共聚焦显微镜的标本制备及图像采集
许多用于共聚焦显微镜的实验技术方法，多以普通光学显微镜为基础，必要时进行改进以适合共聚焦显微镜的需要。对于普通显微镜，主要方法是降低焦点以外的荧光干扰。与普通光学显微镜相比，共聚焦显微镜可进行厚标本深部的荧光观察，对标本的染色要求染色的时间较长或荧光探针的浓度较高，这对于普通光学显微镜可能造成染色过度，而无法分辨其细节。
激光能穿越较厚的标本这一问题解决后，可用普通切片机切出较厚的切片，可也用振动切片机制备活体脑组织切片，在激光扫描共聚焦显微镜下，可获得良好的标记效果。为了观察标本深部也可将标本从切片取下，使其颠倒后再贴到切片上进行观察，从两个方向观察标本。也可用长波长激发的荧光染料，来标记标本较深部位的物质，而不用短波长激发的荧光染料标记，与短波长荧光染料标记的图像相比，其分辨率略有降低，但却获得了较强的穿透力，多光子激光扫描共聚焦显微镜，因为采用了红光作为激发光，则有利于从标本的深部采集图像。
上一页：激光扫描共聚焦显微镜光束扫描的方法 下一页：光学显微镜的使用步骤
