共聚焦显微镜的荧光探针
用于改进免疫荧光定位的新荧光探针的合成影响着共聚焦仪器的发展,其激发和发射光谱与大多数激光扫描共聚焦显微镜提供的激光波长相匹配的荧光染料已经使用多年,改进的与抗体交联的荧光探针仍继续不断出现。
目前可得到许多可对细胞内细胞器和结构进行特异性染色的荧光探针,而且标记的过程非常简单容易,这些荧光探针包括许多标记细胞核、线粒体、高尔基体和内质网的染料,也有可标记细胞内多聚肌动蛋白的荧光标记,这些染料在确定特异性抗原在特定细胞器的定位及其关系时相当有用,可进行抗原和亚细胞结构的多标记研究,也可用来研究细胞内已知蛋白的分布和功能,如微管蛋白等,当进行活细胞成像时,最重要的是要注意加入的荧光探针对实验系统的影响。某些荧光探针可能对活细胞有毒性,尤其是在激光激发的条件下,在培养液中加入维生素c可减低毒性作用。在进行图像采集时,标记的细胞成分也影响细胞活性,细胞核染料比胞浆染料对细胞的损伤更重。
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